Badanie składu potu za pomocą HPLC

Kwas pirogronowy i mlekowy są jednymi ze składników potu. Od niedawna w medycynie analizy substancji potu służą do określania błędów w metabolizmie czy wad serca. Jedna z opracowanych metod równoczesnej analizy tych kwasów oparta jest na wysokosprawnej chromatografii cieczowej HPLC.

Badania potu oraz śliny stają się coraz popularniejsze w medycynie, ze względu na łatwość pobrania próbki, ponadto badanie te nie wymagają ingerencji w ciało człowieka, redukując ryzyko infekcji. Wykazano już dobrą korelację pomiędzy stężeniem kwasu mlekowego w krwi oraz pocie dzięki czemu możliwe jest zrezygnowania w tym kontekście z badań krwi

Emilia Bramanti wraz ze współpracownikami z Instytutu Procesów Chemicznych i Fizycznych Uniwersytetu w Padwie opracowała metodę badania potu za pomocą HPLC, która jest prostsza w zastosowania od dotychczas opublikowanych procedur opartych reakcjach enzymatycznych biosensorach aperometrycznych lub elektrochemiluminescencyjnych oraz elektroforezie kapilarnej.

Włoscy naukowcy pobrali na papier filtracyjny próbki 8 osób, następnie próbki zostały wyekstrahowane wodą i wstrzyknięto bezpośrednio do aparatu HPLC. Składniki potu zostały rozdzielone na kolumnie C18, nośnikiem był roztwór metanolu w buforze fosforanowym o pH 2,5. Zastosowano detektor UV ustawiony na długość fali 220nm. Cała analiza trwałą 20 minut.

Na chromatogramie otrzymano 2 wyraźne piki kwasów mlekowego i pirogronowego, potwierdzone poprzez porównanie z chromatogramem standardowej mieszaniny tych kwasów. Na chromatogramie zaobserwowano również piki pochodząc od kwasu octowego, moczowego i tyrozyny.

(pj)