Zastosowanie kolumn chromatograficznych do oczyszczania antybiotyku ze śladowych zanieczyszczeń

Zastosowanie kolumn chromatograficznych do oczyszczania antybiotyku ze śladowych zanieczyszczeń

Chromatografia Flash to szybka, kolumnowa technika rozdziału powszechnie stosowana do oczyszczania antybiotyków po syntezie lub izolacji z matryc biologicznych. Polega na przepuszczaniu próbki przez napełnioną sorbentem (najczęściej modyfikowany krzemionkowy C18 lub normalno-fazowy w zależności od polarności związku) kolumnę pod zwiększonym ciśnieniem, przy jednoczesnym gradiencie rozpuszczalników, co pozwala na selektywne elucjonowanie substancji. Optymalizacja obejmuje dobór fazy ruchomej (np. mieszaniny acetonitrylu/wody z buforem lub heksan/eter dla związków niepolarnych), szybkości przepływu, oraz frakcjonowania przy użyciu detektorów UV (typowo 210–280 nm) lub detekcji masowej dla złożonych mieszanin.
Chromatografia Flash pozwala szybko uzyskać antybiotyk o wysokiej czystości, ale przy skalowaniu warto uwzględnić koszty sorbentu i zużycie rozpuszczalników oraz potencjalne problemy z degradacją termiczną lub hydrolyzą wrażliwych związków.

Kolumny SepaFlash są rozwiązaniem zapewniającym rozsądny balans pomiędzy jakością i ceną. Dostępne są zarówno wypełnienia niemodyfikowane nieregularne i regularne/sferyczne, jak i żele krzemionkowe z grupami funkcyjnymi C4, C8, C18, C18(AQ), NH2, Diol, Phenyl, Phenyl-Hexyl, ARG, CN, SAX, SCX, kolumny do rozdziału kannabinoidów i kolumny z Al2O3/tlenkiem glinu (kwasowym, obojętnym, zasadowym).

Aby jeszcze bardziej obniżyć koszty rozdziałów, można skorzystać z wielorazowych kolumn iLok do samodzielnego napełniania krzemionką, które można składać bez wykorzystania dodatkowych narzędzi.

Oferowane kolumny posiadają złącza Luer-Lock, przez co pasują praktycznie do każdego dostępnego na rynku chromatografu Flash.

Poniżej przykład oczyszczania związku X z mieszaniny reakcyjnej:
Związek X pochodzenia naturalnego, po wstępnej izolacji z surowca. Próbka nie posiada chromoforów widocznych w dostępnym zakresie detektora UV-Vis, co wymaga zastosowania detektora rozpraszania światła (ELSD).
Kolumna: SepaFlash 4 g z nieregularnym żelem krzemionkowym (SW-5201-004-IR)
Ilość próbki: 250 mg
Przepływ: 30 mL/min
Detekcja: 254 nm, 280 nm, ELSD
Rozpuszczalnik: heksan/octan etylu

Więcej informacji na stronie HAAS:

https://haas.com.pl/zastosowanie-kolumn-chromatograficznych-do-oczyszczania-antybiotyku-ze-sladowych-zanieczyszczen/