Warsztaty laboratoryjne. Praktyczne zastosowanie wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC)

Podstawy chromatografii cieczowej - część pierwsza
Klasyfikacja metod chromatograficznych; Podział chromatografii cieczowej w zależności od mechanizmu decydującego o procesie rozdzielenia; Podstawy teoretyczne procesu rozdzielania; Podstawowe parametry opisujące rozdzielenie; Wpływ różnych parametrów na rozdzielczość i selektywność; Stosowane fazy stacjonarne i dobór odpowiednich faz ruchomych; Metody przygotowania próbki przed analizą;
Budowa układu pomiarowego; Rodzaje kolumn. Detektory. Analiza jakościowa i ilościowa;
Walidacja metody analitycznej
Kierunki rozwoju metod chromatograficznych.
Zajęcia laboratoryjne: Budowa chromatografu cieczowego oraz analiza jakościowa
Podstawy chromatografii cieczowej - część druga
Warsztaty: Obliczanie parametrów na podstawie rzeczywistych chromatogramów
- współczynnik retencji,
- liczba półek teoretycznych,
- współczynnik asymetrii piku,
- rozdzielczość
- przeprowadzanie testu poprawności metody (system suitability test) 2 godziny.
Zajęcia laboratoryjne: Opracowanie warunków rozdzielenia:
- wpływ składu fazy ruchomej oraz pH na rozdzielenie
Technika sprzężona chromatografia cieczowa - spektrometria mas (LC/MS)
Podstawy spektrometrii mas - widma masowe, metody jonizacji próbki: elektrorozpylanie (elektrosprej) i jonizacja chemiczna pod ciśnieniem atmosferycznym (APCI-atmosheric presure chemical ionization), budowa kwadrupolowego spektrometru mas.
Zajęcia laboratoryjne: Wykorzystanie chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (HPLC/MS) do identyfikacji związków fenolowych w wybranych produktach spożywczych
Typowe problemy w HPLC- podsumowanie i dyskusja